Как и наш набор для бесшовного клонирования и сборки первого поколения, набор для клонирования и сборки GeneArt™ Seamless PLUS представляет собой полный комплект для одновременного и направленного клонирования от 1 до 4 ПЦР-фрагментов, состоящих из любой последовательности, в любой линеаризованный вектор в ходе одной реакции при комнатной температуре продолжительностью 30 минут или менее. Однако Seamless PLUS обладает рядом преимуществ по сравнению с предыдущими наборами:- Повышенная эффективность: возможность предварительного клонирования больших фрагментов для повышения эффективности клонирования- Большие конструкции: создание конструкций до 40 кб- Универсальность: высокопроизводительный конъюгативный вектор широкого спектра действия, реплицирующийся в большинстве грамотрицательных бактерийУказанные выше улучшения сочетаются с ключевыми преимуществами, присущими всем наборам GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly:- Скорость и простотаКлонирование до 4 фрагментов ДНК с выбранной вами последовательностью одновременно в одном векторе; Точность и эффективность - клонирование нужных фрагментов в нужной ориентации и до 90% правильных клонов без лишних последовательностей - Бесплатные инструменты - разработка конечной конструкции и олигосом ДНК in silico с помощью нашего бесплатного веб-инструмента, который шаг за шагом проведет вас через весь проект - Гибкость вектора - использование нашего линейного вектора или вектора по вашему выбору - Различные области применения - оптимизация многих методов синтетической биологии и молекулярной биологии за счет быстрого комбинирования, Для клонирования более 4 фрагментов ДНК или для конечных молекул размером более 110 Кб, пожалуйста, рассмотрите систему высокопорядковой генетической сборки GeneArt™.Простое и быстрое создание клоновGeneArt™ Seamless PLUS Cloning - это простой двухэтапный процесс, состоящий из сборки in vitro и последующей трансформации в One Shot™ DH10B™ T1R SA компетентной E. coli. В наборе используется запатентованная смесь ферментов и буферов для сборки фрагментов ДНК с общей гомологией терминальных концов без лишних последовательностей и шрамов в конечной конструкции ("бесшовная" сборка). Гомология терминальных концов легко включается путем ПЦР-амплификации с использованием пользовательских ДНК-олиго, созданных с помощью нашего бесплатного веб-инструмента.Эффективность, гибкость и точность клонированияВ наборе для клонирования и сборки GeneArt™ Seamless PLUS основными факторами, влияющими на эффективность клонирования, являются размер фрагментов ДНК (от 100 п.н. до 10 Кб), общий размер конечной молекулы (≤ 40 Кб), а также качество и специфичность каждого фрагмента.Типичная эффективность клонирования для различного количества фрагментов:- >95% для 4 фрагментов по 5 Кб каждый- >90% для 4 фрагментов по 10 Кб каждыйУспех клонирования не зависит от последовательности вставки и типа вектора, что позволяет конструировать и добавлять практически любую желаемую последовательность или комбинацию последовательностей в любую плазмиду, если она может быть линеаризована либо перевариванием ферментами рестрикции, либо ПЦР. Циркуляризованные клоны, полученные в результате реакции, содержат только последовательность исходного вектора, вставки и обозначенные гомологии, без посторонних нуклеотидных вставок.in silico Design SupportКлючевым шагом в GeneArt™ Seamless PLUS Cloning является правильный дизайн фрагментов и олигосом с соответствующей гомологией и расстоянием между ними, чтобы обеспечить успешную сборку вашего клона. Мы предоставляем бесплатный онлайн-инструмент GeneArt™ Design Tool for Seamless or High-Order Assembly and Mutagenesis, который поможет вам в разработке эксперимента in silico. Инструмент проверяет соответствие экспериментальной схемы спецификациям продукта, подбирает ДНК-олигоны с гомологией концов для ПЦР-амплификации различных элементов для клонирования и предоставляет пользователю графическое представление вектора, а также загружаемую аннотированную последовательность в формате GenBank, совместимую с ПО Vector NTI™.ПрименениеНабор для клонирования и сборки GeneArt™ Seamless PLUS предназначен для расширения возможностей клонирования и сборки ДНК в широком диапазоне приложений молекулярной биологии и синтетической биологии и др. Набор позволяет создавать модульные экспрессионные векторы с взаимозаменяемыми частями и может использоваться для выполнения различных задач, которые в противном случае потребовали бы выполнения нескольких этапов. С помощью набора можно конструировать белки слияния, удалять, заменять или добавлять элементы ДНК, такие как сайты рестрикции, в существующий вектор, а также выполнять многие другие операции, требующие манипулирования генетическими последовательностями.
- Бренд Invitrogen™
Отзывы покупателей