В комплект поставки входят набор для сайт-направленного мутагенеза Phusion и компетентные клетки DH10B, оптимизированные для работы с набором.Набор для сайт-направленного мутагенеза PhusionНабор для сайт-направленного мутагенеза Thermo Scientific Phusion представляет собой универсальный и эффективный инструмент для внесения точечных мутаций, вставок или делеций в любой тип плазмидной ДНК. В этом наборе вся плазмида амплифицируется с использованием фосфорилированных праймеров, которые вносят желаемые изменения. Амплифицированный линейный ПЦР-продукт, содержащий нужную мутацию, подвергается циркуляции в 5-минутной реакции лигирования с помощью ДНК-лигазы T4. Полученная плазмида может быть затем трансформирована в клетки E.coli. Для работы с набором рекомендуется использовать компетентные клетки DH10B. Оптимальная температура отжига для ДНК-полимеразы Phusion может значительно отличаться от температуры отжига для полимераз на основе Taq. Для получения оптимальных результатов начните с точного расчета Tm с помощью нашего калькулятора Tm.- Прочный и надежный метод экспоненциальной амплификации- Отсутствие требований, таких как специальные векторы, сайты рестрикции или статус метилирования целевой плазмиды- Отсутствие необходимости разрушать стартовый шаблон на отдельном этапе- ДНК-полимераза Phusion Hot Start II High Fidelity минимизирует нежелательные вторичные мутации- Амплификация больших плазмид до 10 кб- Модификация полимеразы Hot Start предотвращает амплификацию неспецифических продуктов и нежелательную деградацию праймеров до первого цикла ПЦР- ДНК-лигаза T4 входит в состав набора; Не требуется никаких этапов очистки до или после лигированияКомпетентные клетки DH10BКомпетентные клетки DH10B компании Thermo Scientific представляют собой высокоэффективные, химически компетентные клетки E.coli. Штамм DH10B подходит для клонирования ДНК, содержащей метилцитозин и метиладенин, что позволяет эффективно клонировать как прокариотическую, так и эукариотическую геномную ДНК. Эти клетки идеально подходят для создания библиотек кДНК с использованием плазмидных векторов. Генотип: F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ- rpsL(StrR) nupG.- Высокая эффективность трансформации: >Подходит для рутинных и высокопроизводительных задач клонирования и мутагенеза- Удобная упаковка по две реакции на флакон- Среда для выращивания S.O.C. в комплектеРелевантные продуктыКомплект для сайт-направленного мутагенеза Phusion компании Termo Scientific без компетентных клеток
- Количество в упаковке 20 Reactions
- Бренд Thermo Scientific™
Отзывы покупателей